Utile Per
Determinazione dello stato immunitario dei soggetti al virus della rosolia a seguito della vaccinazione o di una precedente esposizione ad esso.
Come indicazione di un’infezione passata o recente da Toxoplasma gondii, citomegalovirus o virus dell’herpes simplex (HSV).
Distinguere tra infezioni causate da HSV di tipo 1 e 2, specialmente in pazienti con infezione da HSV subclinica o non riconosciuta.
Informazioni Cliniche
Toxoplasma gondii:
Il Toxoplasma gondii è un protozoo, un parassita intracellulare obbligato in grado di infettare una varietà di ospiti intermedi, compresi gli esseri umani. Gli ospiti infetti definitivi (gatti) si liberano di oocisti nelle feci che maturano rapidamente nel terreno e diventano infettivi. La toxoplasmosi è acquisita dall’uomo attraverso l’ingestione di cibo o acqua contaminati da feci di gatto o attraverso il consumo di carne poco cotta contenente oocisti vitali. Può avvenire anche la trasmissione verticale del parassita attraverso la placenta, che porta alla toxoplasmosi congenita. A seguito di un’infezione primaria, il Toxoplasma gondii può rimanere latente durante tutta la vita dell’ospite; il rischio di riattivazione è maggiore negli individui immunosoppressi.
Gli studi di sieroprevalenza eseguiti negli Stati Uniti indicano che circa il 9-11% degli individui tra i 6 e i 49 anni di età presentano anticorpi contro il Toxoplasma gondii. L’infezione negli adulti immunocompetenti è tipicamente asintomatica. Nei casi sintomatici, i pazienti presentano comunemente linfadenopatia e altri sintomi sistemici non specifici, rendendo difficile la diagnosi definitiva.
Le infezioni da grave a fatale possono verificarsi tra pazienti affetti da AIDS o individui altrimenti immunodepressi. Si pensa che queste infezioni siano causate dalla riattivazione di infezioni latenti e solitamente coinvolgono il sistema nervoso centrale.
La trasmissione transplacentare dei parassiti con conseguente toxoplasmosi congenita può avvenire durante la fase acuta dell’infezione contratta dalla madre. Il rischio di infezione fetale si presenta quando l’infezione acuta della madre si verifica durante la gravidanza. L’incidenza della toxoplasmosi congenita aumenta con il progredire della gravidanza; al contrario, la gravità della toxoplasmosi congenita è maggiore quando l’infezione materna è contratta precocemente durante la gravidanza. La maggior parte dei neonati infettati in utero sono asintomatici alla nascita, soprattutto se l’infezione materna si verifica durante il terzo trimestre, con conseguenze che si presentano più tardi nella vita. La toxoplasmosi congenita provoca una grave malattia generalizzata o neurologica in circa il 20-30% dei neonati infettati in utero; circa il 10% mostra un coinvolgimento solo oculare e il resto è asintomatico alla nascita. L’infezione subclinica può provocare un parto prematuro e conseguenti difetti neurologici, intellettuali e audiologici.
Rosolia:
La rosolia (morbillo tedesco o morbillo di 3 giorni) è un membro della famiglia dei togavirus e gli esseri umani rimangono l’unico ospite naturale per questo virus. La trasmissione avviene tipicamente attraverso l’inalazione di goccioline respiratorie infettive aerosolizzate e il periodo di incubazione in seguito all’esposizione può variare da 12 a 23 giorni. L’infezione è generalmente lieve ed autolimitata, ed è caratterizzata da uno sfogo cutaneo maculo-papuloso che parte dal viso e si diffonde al tronco e alle estremità, febbre, malessere e linfadenopatia.
Innanzitutto, le infezioni da rosolia in utero possono portare a gravi conseguenze per il feto, in particolare se l’infezione si verifica entro i primi 4 mesi di gravidanza. La sindrome della rosolia congenita è spesso associata a perdita dell’udito, difetti cardiovascolari e oculari.
Il programma di vaccinazione a 2 dosi di morbillo, parotite, rosolia (MMR) degli Stati Uniti, che prevede la vaccinazione di tutti i bambini, porta alla sieroconversione nel 95% dei bambini dopo la prima dose. Un totale di 4 casi di rosolia è stato segnalato al CDC nel 2011 senza alcun caso di sindrome da rosolia congenita. A causa del successo del programma di vaccinazione nazionale, la rosolia non è più considerata endemica negli Stati Uniti (cdc.gov/rubella). L’immunità può tuttavia diminuire con l’età, poiché circa l’80-90% degli adulti mostrano evidenze sierologiche di immunità alla rosolia.
Citomegalovirus (CMV):
Il CMV è un membro della famiglia dei virus Herpesviridae e di solito causa un’infezione asintomatica per poi rimanere latente nei pazienti, principalmente all’interno delle cellule derivate dal midollo osseo. L’infezione primaria da CMV in soggetti immunocompetenti può anche manifestarsi con malattie come la mononucleosi, simile all’infezione primaria da virus di Epstein-Barr, con febbre, malessere e linfadenopatia.
Il CMV è una causa significativa di morbilità e mortalità tra i riceventi di trapianti di midollo osseo o di organi solidi, gli individui con AIDS e altri pazienti immunodepressi a causa della riattivazione del virus o di una nuova infezione contratta. L’infezione in questi tipi di pazienti può colpire quasi tutti gli organi e portare al fallimento di più organi. Il CMV è anche responsabile di malattie congenite tra i neonati ed è una delle infezioni ToRCH (toxoplasmosi, altre infezioni tra cui sifilide, rosolia, CMV e virus dell’herpes simplex [HSV]).
La sieroprevalenza del CMV aumenta con l’età. Negli Stati Uniti la prevalenza degli anticorpi specifici del CMV aumenta da circa il 36% a oltre il 91% negli adolescenti di età compresa tra i 6 e gli 11 anni e negli adulti di età superiore agli 80 anni, rispettivamente.
Virus dell’herpes simplex (HSV) di tipo 1 e 2:
I tipi 1 e 2 dell’HSV sono membri dell’Herpesviridae e producono infezioni che possono spaziare da una lieve stomatite a malattie diffuse e mortali. Le condizioni cliniche associate all’infezione da HSV includono gengivostomatite, cheratite, encefalite, eruzioni cutanee vescicolari, meningite asettica, herpes neonatale, infezioni del tratto genitale e infezione primaria diffusa.
Le infezioni da HSV di tipo 1 e 2 possono differire significativamente nelle loro manifestazioni cliniche e nella loro gravità. L’HSV di tipo 2 causa principalmente infezioni urogenitali e si trova quasi esclusivamente negli adulti. L’HSV di tipo 1 è strettamente associato all’infezione orolabiale, ma con questo virus anche l’infezione genitale può essere comune in alcune popolazioni.
La diagnosi delle infezioni da HSV viene fatta di routine sulla base di risultati clinici e supportata da test di laboratorio con PCR o coltura virale. Tuttavia, in casi di infezione da HSV subclinica o non riconosciuta, possono essere utili i test sierologici per la ricerca di anticorpi di classe IgG rispetto alla glicoproteina G (gG) contro un tipo specifico di HSV. Ci sono diverse circostanze in cui può essere importante distinguere tra infezione causata da HSV di tipo 1 e 2. Ad esempio, il rischio di riattivazione è più elevato per l’HSV di tipo 2 e il metodo di terapia antivirale può essere diverso a seconda del tipo specifico di HSV che causa la malattia. Inoltre, i risultati dei test degli anticorpi di classe IgG contro un tipo specifico di HSV vengono talvolta utilizzati durante la gravidanza per identificare i rischi di malattia dell’HSV congenita e consentire una consulenza mirata prima del parto.
Valori di Riferimento
Toxoplasma ANTICORPO, IgG
Negativo
Toxoplasma IgG
< o =9 UI/mL (Negativo)
10-11 IU/mL (Equivoco)
> o =12 IU/mL (Positivo)
ANTICORPO RUBELLA, IgG
Vaccinato: Positivo (> o =1.0 AI)
Non vaccinati: Negativo (< o =0.7 AI)
CITOMEGALOVIRUS
Negativo.
VIRUS DELL’HERPES SIMPLEX (HSV), ANTICORPI DI TIPO 1 E 2, IgG
Virus dell’herpes simplex (HSV) tipo 1, IgG
Negativo.
Virus dell’herpes simplex (HSV) tipo 2, IgG
Negativo.
Interpretazione
Toxoplasma gondii:
Un risultato positivo degli anticorpi di classe IgG contro il Toxoplasma è indicativo di un’infezione attuale o passata da Toxoplasma gondii. Un solo risultato positivo di anticorpi di classe IgG contro il Toxoplasma non può essere utilizzato per diagnosticare un’infezione recente.
Risultati equivoci degli anticorpi di classe IgG anti-Toxoplasma possono essere dovuti a livelli molto bassi di IgG in circolo durante la fase acuta dell’infezione. Se clinicamente indicato, un secondo campione deve essere sottoposto ad analisi.
Si presume che gli individui con risultati negativi di anticorpi di classe IgG contro il Toxoplasma non abbiano avuto una precedente esposizione al T gondii. Tuttavia, risultati negativi possono essere riscontrati in casi di esposizione remota con conseguente perdita di anticorpi rilevabili. La sieroconversione da anticorpi IgG negativi a IgG positivi è indicativa di un’infezione da T gondii successiva al primo campione negativo.
Rosolia:
Positivo: La presenza di anticorpi rilevabili di classe IgG anti-rosolia indica una precedente esposizione all’infezione oppure l’immunizzazione. Gli individui che risultano positivi agli anticorpi di classe IgG anti-rosolia sono considerati immuni.
Equivoco: Presentare un ulteriore campione da analizzare entro 10-14 giorni per dimostrare la sieroconversione IgG se recentemente vaccinato o in altro modo se indicato clinicamente.
Negativo: L’assenza di anticorpi rilevabili di classe IgG anti-rosolia suggerisce l’assenza di una precedente esposizione a questo virus o la mancanza di una risposta immunitaria specifica all’immunizzazione.
Citomegalovirus (CMV):
I risultati positivi degli anticorpi di classe IgG anti-CMV indicano un’infezione da CMV passata o recente. Questi individui possono trasmettere il CMV a soggetti sensibili attraverso il sangue e i prodotti tissutali.
I risultati equivoci degli anticorpi di classe IgG anti- CMV possono verificarsi durante l’infezione acuta o possono essere dovuti a reazioni vincolanti non specifiche. Presentare un ulteriore campione per il test se clinicamente indicato.
Si presume che gli individui con risultati negativi degli anticorpi di classe IgG anti-CMV non abbiano avuto una precedente esposizione o infezione da CMV e sono quindi considerati suscettibili di infezione primaria.
Virus dell’herpes simplex (HSV):
La presenza di anticorpi di classe IgG anti-HSV di tipo 1 o 2 indica una precedente esposizione e non indica necessariamente che l’HSV sia l’agente eziologico di una malattia acuta.
Avvertenze
Toxoplasma gondii:
I sieri prelevati molto presto durante la fase acuta dell’infezione possono avere livelli di anticorpi di classe IgG contro il Toxoplasma inferiori a 9 UI/mL.
Il solo test degli anticorpi di classe IgG contro il Toxoplasma non deve essere utilizzato per diagnosticare un’infezione recente da Toxoplasma gondii. I risultati devono essere considerati insieme alla presentazione clinica, all’anamnesi del paziente e ad altri risultati di laboratorio.
Le caratteristiche di prestazione di questo test non sono state valutate in individui immunodepressi e non sono state stabilite per il sangue del cordone ombelicale o per eseguire il test sui neonati.
Rosolia:
I campioni prelevati precocemente durante la fase acuta dell’infezione o poco tempo dopo (1-2 settimane) la vaccinazione possono risultare negativi per gli anticorpi di classe IgG.
Citomegalovirus (CMV):
I sieri prelevati precocemente durante la fase acuta dell’infezione possono presentare livelli non rilevabili di anticorpi di classe IgG anti-CMV.
Il test degli anticorpi IgG contro il CMV non deve essere utilizzato da solo per diagnosticare l’infezione da CMV. I risultati devono essere considerati insieme alla presentazione clinica, all’anamnesi del paziente e ad altri risultati di laboratorio. In caso di sospette malattie, presentare un secondo campione per il test entro 10-14 giorni.
Le caratteristiche di prestazione di questo test non sono state valutate in pazienti immunodepressi o che hanno subito un trapianto d’organo e non sono state stabilite per il sangue del cordone ombelicale o per sottoporre i neonati a test.
Immunocomplessi o altri aggregati di immunoglobuline presenti nel campione del paziente possono causare un aumento del legame non specifico e produrre risultati falsi-positivi.
La potenziale reattività incrociata per il CMV con gonadotropina corionica umana, anticorpi IgG contro l’HIV, IgG contro il mieloma multiplo, IgM contro il fattore reumatoide e IgG contro il Toxoplasma gondii non sono da escludere.
Virus dell’herpes simplex (HSV) di tipo 1 e 2:
Il rilevamento di anticorpi di classe IgG contro l’HSV non deve essere usato di routine come mezzo primario per diagnosticare l’infezione da HSV. Per i pazienti che presentano una presunta infezione acuta da HSV, un campione clinico (ad esempio, lesione orale, dermica o genitale) deve essere sottoposto a campionamento e presentato per il rilevamento di HSV di tipo 1 e 2 mediante PCR rapida (LHSV / Virus dell’Herpes Simplex [HSV], rilevamento molecolare, PCR).
I campioni di siero prelevati precocemente nel corso dell’infezione possono non avere livelli rilevabili di anticorpi IgG anti-HSV. In caso di sospetta malattia precoce, un campione di siero per la ripetizione del test deve essere prelevato da 14 a 21 giorni dopo e sottoposto ad analisi.
La presenza di anticorpi di classe IgG contro l’HSV di tipo 1 o 2 non distingue tra infezione remota e malattia acuta.
La sierologia dell’HSV non è in grado di distinguere le infezioni genitali da quelle non genitali.
Il valore predittivo dei risultati positivi o negativi dipende dalla prevalenza della malattia e dalla preesistente probabilità che si tratti di HSV di tipo 1 e HSV di tipo 2. Possono verificarsi risultati falsi-positivi. I test ripetuti, o i test eseguiti utilizzato un metodo diverso, possono essere indicati in alcuni contesti (ad esempio, in pazienti con bassa probabilità di infezione da HSV).
Dati di Supporto
Toxoplasma gondii:
Per valutare l’accuratezza del test immunoenzimatico a flusso multiplo BioPlex Toxoplasma IgG, sono stati analizzati in cieco dal test immunoenzimatico a fluorescenza legato all’enzima VIDAS (ELFA; bioMerieux, Durham, NC) anche 600 campioni di siero prospettico presentati per il test di routine del Toxoplasma IgG dal test BioPlex entro un periodo di 24 ore. Campioni con risultati discordanti dopo il test iniziale sono stati ripetuti da entrambi i test durante lo stesso ciclo di congelamento/scongelamento. Un’ulteriore risoluzione dei risultati discordanti è stata eseguita inviando i campioni alla Palo Alto Medical Foundation per essere esaminati. I risultati sono riassunti qui di seguito:
| Toxoplasma IgG (VIDAS ELFA) | |||
BioPlex Toxoplasma IgG |
| Positivo | Negativo | Equivoco |
Positivo | 63 | 2(a) | 6 | |
Negativo | 0 | 528 | 0 | |
Equivoco | 0 | 0 | 1 | |
a) Entrambi i campioni di siero sono risultati negativi al test del colorante Sabin-Feldman presso il laboratorio per il Toxoplasma della Palo Alto Medical Foundation.
Sensibilità: 100% (63/63); Intervallo di Confidenza del 95% (95% CI): dal 93,1% al 100%.
Specificità: 99,6% (528/530); 95% CI: dal 98,5% al 99,9%.
Percentuale Complessiva di Accordo: 98,7% (592/600); 95% IC: 97,3% al 99,4%.
Rosolia:
Per valutare l’accuratezza del test immunoenzimatico a flusso multiplo (MFI) BioPlex Rubella IgG, 500 potenziali campioni di siero sono stati analizzati in cieco dal SeraQuest Rubella IgG IEA (Quest Int., Doral, FL) e dal test BioPlex Rubella IgG. Campioni con risultati discordanti dopo il test iniziale sono stati ripetuti da entrambi i test durante lo stesso ciclo di congelamento/scongelamento. Ulteriori discrepanze sono state valutate dal test immunoenzimatico fluorescente legato all’enzima VIDAS per anticorpi IgG contro la rosolia (ELFA; bioMerieux, Inc.). I risultati sono riassunti qui di seguito:
| SeraQuest Rosolia IgG EIA | |||
BioPlex Rosolia IgG |
| Positivo | Negativo | Equivoco |
Positivo | 446 | 0 | 0 | |
Negativo | 7(a) | 23 | 4 | |
Equivoco | 17 | 0 | 3 | |
a) 6/7 campioni esaminati come equivoci dalla VIDAS Rubella IgG ELFA.
Sensibilità: 94% (446/470); 95% Intervallo di Confidenza (95% CI): dal 92,5% al 96,6%.
Specificità: 100% (23/23); 95% CI: 83,1% a 100%
Percentuale Complessiva di Accordo: 94,4% (472/500); 95% IC: dal 92,0% al 96,1%.
Citomegalovirus (CMV):
Per valutare l’accuratezza del test immunoenzimatico a flusso multiplo BioPlex CMV IgG per gli anticorpi IgG contro il CMV, 598 campioni di siero prospettico presentati per il test di routine per gli anticorpi IgG contro il CMV eseguito con il test immunoenzimatico a fluorescenza legato all’enzima VIDAS (ELFA; bioMerieux, Durham, NC) sono stati analizzati in cieco dal test BioPlex in un periodo di 24 ore. Campioni con risultati discordanti dopo il test iniziale sono stati ripetuti con entrambi i test durante lo stesso ciclo di congelamento/scongelamento. Un’ulteriore risoluzione dei risultati discordanti è stata eseguita utilizzando il test immunoenzimatico Diamedix CMV IgG. I risultati sono riassunti di seguito:
| CMV IgG (VIDAS ELFA) | |||
BioPlex CMV IgG |
| Positivo | Negativo | Equivoco |
Positivo | 336 | 2(a) | 0 | |
Negativo | 3(b) | 254 | 3 | |
Equivoco | 0 | 0 | 0 | |
a) Entrambi i campioni di siero sono risultati negativi al Diamedix CMV IgG EIA
b) Tutti e 3 i campioni di siero sono risultati negativi al Diamedix CMB IgG EIA
Sensibilità: 99,1% (336/339); Intervallo di Confidenza del 95% (95% CI): dal 97,3% al 99,8%.
Specificità: 99,2% (254/256); 95% CI: dal 97,0% al 100%.
Percentuale Complessiva di Accordo: 98,7% (590/598); 95% IC: dal 97,3% al 99,4%.
Virus dell’herpes simplex (HSV) di tipo 1:
Per valutare l’accuratezza del test BioPlex HSV, 505 potenziali campioni di siero sono stati analizzati dall’EIA (HerpeSelect, Focus Diagnostics, Cypress, CA) e dal saggio BioPlex HSV-1/2 IgG. I campioni che presentavano risultati discordanti dopo il test iniziale sono stati ripetuti con entrambi i test durante lo stesso ciclo di congelamento/scongelamento. Ulteriori discrepanze sono state valutate mediante western blot (WB) specifici per tipo di glicoproteina G (igG) presso il laboratorio di virologia dell’Università di Washington (Seattle, WA). I risultati sono riassunti nelle tabelle 1 e 2 qui di seguito:
Tabella 1. | HSV-1 by HerpeSelect EIA | |||
BioPlex HSV-1 IgG |
| Positivo | Negativo | Equivoco |
Positivo | 254 | 5(a) | 0 | |
Negativo | 2(b) | 240 | 1 | |
Equivoco | 0 | 3 | 0 | |
a) Tutti e 5 i campioni sono risultati positivi per WB;
b) Entrambi i campioni sono risultati positivi per WB;
Sensibilità: 99,2% (254/256); Intervallo di Confidenza del 95% (95% CI): dal 97,0% al 99,9%.
Specificità: 96,8% (240/248); 95% CI: 93,7% al 98,5%.
Percentuale Complessiva di Accordo: 97,8% (494/505); 95% IC: dal 96,1% al 98,8%.
Table 2. | HSV-2 by HerpeSelect EIA | |||
BioPlex HSV-2 IgG |
| Positive | Negative | Equivocal |
Positive | 115 | 9(a) | 2 | |
Negative | 1(b) | 376 | 0 | |
Equivocal | 1 | 1 | 0 | |
a) Due di questi 9 campioni sono risultati positivi da parte di WB, 2 di questi 9 campioni sono risultati equivoci da parte di WB.
b) Questo campione era negativo per WB
Sensibilità: 98,3% (115/117); 95% CI: 93,6% al 99,9%.
Specificità: 97,4% (376/386); 95% CI: da 95,2% a 98,7%
Percentuale Complessiva di Accordo: 97,2% (376/386); 95% IC: 95,4% al 98,4%.
