Utile per
Rilevamento rapido del DNA del virus BK
Informazioni cliniche
I poliomavirus sono virus piccoli (45 nm, circa 5.000 coppie di basi), contenenti DNA e comprendono 3 virus strettamente correlati e di rilevanza clinica, il Simian virus 40 (SV-40), il JC virus (JCV) e il BK virus (BKV). il SV-40 infetta naturalmente le scimmie rhesus ma può infettare anche l’uomo, mentre il BKV e il JCV causano un’infezione produttiva solo nell’uomo. L’esordio clinico dell’acquisizione del BKV avviene nell’infanzia. L’evidenza sierologica dell’infezione da BKV è presente nel 37% degli individui entro i primi 5 anni di vita e in oltre l’80% degli adolescenti.
Il BKV costituisce un’importante causa di nefrite interstiziale e nefropatia associata (BKVAN) nei riceventi di trapianti di rene. Fino al 5% dei riceventi di trapianto renale può essere affetto, e tra questi pazienti il tempo medio dal trapianto alla diagnosi è di circa 40 settimane (intervallo 6-150). L’analisi PCR del DNA di BKV nel plasma è l’esame del sangue più usato per la diagnosi di laboratorio della nefropatia associata al BKV. È importante sottolineare che la presenza di DNA di BKV nel sangue riflette la dinamica della malattia: la conversione del plasma da negativo a positivo per DNA di BKV dopo il trapianto, la presenza di DNA nel plasma in combinazione con la persistenza della nefropatia, e la sua scomparsa dal plasma dopo la riduzione della terapia immunosoppressiva. Carichi virali superiori a 10.000 copie/mL nel plasma possono indicare un rischio per BKVAN (vedere QBK / BK Virus, Molecular Detection, Quantitative, PCR, Plasma).
Valori di riferimento
Negativo
Interpretazione
I risultati degli esami delle urine sono riportati in termini di presenza o assenza del virus BK (BKV).
Il rilevamento del DNA del BKV in campioni clinici può supportare la diagnosi clinica di malattia renale o urologica dovuta al BKV. Si raccomanda la correlazione dei risultati qualitativi con la presentazione clinica e la carica virale BK nelle urine e/o nel plasma.
Avvertenze
Un risultato negativo non esclude la possibilità di un’infezione da virus BK (BKV).
Questo esame è destinato a pazienti con fattori di rischio adeguati per la malattia associata al BKV e non è indicato per lo screening di pazienti asintomatici.
Dati di supporto
La seguente convalida supporta l’utilità di questo esame per i test clinici.
Precisione/Sensibilità e specificità diagnostica:
I risultati di questo test PCR in tempo reale sul LightCycler (LC PCR) sono stati confrontati con un precedente test PCR (diretto alla regione VP2 del virus del polioma basato su un metodo pubblicato) su 112 campioni di plasma e 108 campioni di urina. Utilizzando il metodo precedente come gold standard, la sensibilità e la specificità diagnostica è rispettivamente del 94% e del 90% per il plasma e del 100% e 100% per le urine. I campioni discordanti avevano un basso numero di copie di DNA virale (<5.000 copie/ml) e potrebbero non essere stati riproducibili.
Dati Supplementari (Studi di spiking):
Per integrare i dati riferiti precedentemente, 30 campioni di plasma e di urina negativi sono stati sottoposti a spiking con il plasmide di controllo positivo del virus BK (BKV) vicino al limite di rilevazione (LoD-Limite di Rilevabilità). I 30 campioni spiked (arricchiti/fortificati) sono stati analizzati in cieco insieme a 57 campioni di plasma e 58 di urina negativa (non-spiked/arricchiti). Il 100% dei campioni spiked erano positivi e il 100% dei campioni non-spiked(arricchiti/fortificati) erano negativi.
Sensibilità analitica/LoD:
Il LoD di questo test è di 244 copie target di DNA per ogni ml di urina e plasma.
Specificità analitica:
Non è stato ottenuto alcun segnale PCR dagli estratti di una varietà di virus umani che si possono osservare nelle urine o nel plasma, inclusi citomegalovirus, virus Epstein-Barr, herpesvirus-6 umano, enterovirus, adenovirus e virus degli orecchioni.
Precisione:
La precisione inter-dosaggio è stata del 100% e la precisione intra-dosaggio è stata del 100%.
Intervallo di riferimento:
L’ intervallo di riferimento del BKV nel plasma è negativo.
Nei pazienti con trapianto renale, copie della carica virale plasmatica di >10.000 copie/ml possono indicare un aumento del rischio di malattia da BKV. Pertanto, un test quantitativo può essere appropriato in questa popolazione (vedi QBK / BK Virus, Molecular Detection, Quantitative, PCR, Plasma).
Intervallo riferibile:
Si tratta di un test qualitativo e i risultati sono riportati come negativi o positivi per il BKV mirato.
