Utile per
Ottenere rapidamente una diagnosi di diarrea associata a Clostridium difficile(CDAD) e colite pseudomembranosa (PMC)
Informazioni cliniche
Il Clostridium difficile è la causa della diarrea associata a C. difficile (CDAD), della diarrea associata ad antibiotici e della colite pseudomembranosa (PMC). In questi disturbi la crescita eccessiva batterica di C difficile si sviluppa nel colon, tipicamente come conseguenza dell’uso di antibiotici. Clindamicina e cefalosporine ad ampio spettro sono stati più frequentemente associati a CDAD e PMC, ma quasi tutti gli antimicrobici possono essere responsabili. La malattia è correlata alla produzione della tossina A e B. Il trattamento comporta tipicamente il ritiro degli antimicrobici associati e, se i sintomi persistono, somministrazione per via orale ed endoluminale di metronidazolo attivo, vancomicina, o fidaxomicina. Il metronidazolo per via endovenosa può essere usato se non è possibile somministrare un agente per via orale. Negli ultimi anni, una forma più grave di CDAD con un aumento della morbilità e della mortalità è stata riconosciuta come causata da un ceppo di C difficile (ceppo NAP1) che produce tossine epidemiche. Molti isolati che producono tossine contengono anche il gene della tossina binaria e sono resistenti ai chinoloni. Questo test non distingue tra i ceppi produttori di tossine e quelli non produttori di tossine.
Tradizionalmente, la diagnosi si basava su 1) caratteristiche cliniche ed epidemiologiche, 2) colture, che richiedono molto lavoro e tempo, 3) test di citotossicità, che richiedono molto lavoro e tempo, e 4) immunodosaggi per il rilevamento delle tossine, che sono insensibili. L’esame di PCR descritto rileva il gene regolatore (tcdC) responsabile della produzione delle tossine A e B. Questo test è utilizzato per la diagnosi rapida di CDAD e PMC, consentendo un trattamento rapido che può ridurre i ricoveri ospedalieri per i pazienti con CDAD.
Valori di riferimento
Non applicabile
Interpretazione
Un risultato positivo dell’esame PCR per la presenza del gene che regola la produzione di tossine (tcdC) indica la presenza di Clostridium difficile e della tossina A e/o B.
Un risultato negativo indica l’assenza di DNA di C difficile tcdC rilevabile nel campione, ma non esclude l’infezione da C difficile. Risultati falsi negativi possono verificarsi a causa dell’inibizione della PCR, della variabilità della sequenza alla base dei test elementari (primer) o delle sonde, o della presenza di C difficile in quantità inferiori al valore limite di rilevazione dell’ esame.
Avvertenze
Il dosaggio deve essere eseguito su feci fresche, feci fresche surgelate o feci nel mezzo di trasporto.
L’esame non è stato convalidato come esame di guarigione. Poiché l’acido nucleico può persistere dopo un trattamento efficace, il test di monitoraggio di un risultato positivo non è raccomandato.
Sostanze interferenti nelle feci possono influenzare l’accuratezza del dosaggio; i risultati devono sempre essere interpretati in combinazione con i risultati clinici ed epidemiologici.
La presentazione di più di 1 campione per il test non è raccomandata.
Il test di colostomia, ileostomia o campioni prelevati per colonscopia non è stato convalidato.
I pazienti possono essere portatori asintomatici di Clostridium difficile; è necessaria una correlazione clinica quando si decide come gestire i pazienti con un risultato positivo del test.
Dati di supporto
I risultati del test PCR sono stati confrontati con quelli del Clostridium difficile, che rilevano la tossina VIA e la coltura di C difficile. Duecento campioni fecali sono stati studiati in cieco. C difficile è stato isolato da 49 campioni mediante coltura e 44 di questi sono stati confermati come contenenti 1 dei geni associati alla produzione di tossine (coltura tossicologica). Utilizzando la coltura tossicologica come “gold standard”, le sensibilità e le specificità degli esami sono state rispettivamente del 48% e del 98% per la Premier Toxin A/B EIA; 48% e 99% per il test della tossina ImmunoCard A e B; 48% e 84% per il test della tossina Xpect C difficile A/B ; 32% e 100% per il pannello Triage C difficile (per la tossina A); e 86% e 97% per il test PCR. Non è stata osservata alcuna reattività crociata nel test PCR con un pannello di 51 agenti patogeni e flora normale, incluse altre specie C. La sensibilità analitica / limite di rilevazione per l’esame PCR è stata di 35,8 cellule / mcL in feci fresche estratte e 358 cellule / mcL in feci estratte conservate.Clostridium difficile tossine A e BClostridium difficile tossine A e B
